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標題:
淺談培養基的組成
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作者:
ausfarmer
時間:
2012-2-19 11:34
標題:
淺談培養基的組成
1.[水]
水是生命所必不可缺少的,是細胞的組成成分之一。它使細
胞質呈腹體狀態、活化狀態;也是細胞中各種生理、生化反應的
介質,維持細胞一定滲透壓與膨壓的作用。並為植物機體提
供氫、氧元素。
2.[大量元素]
除碳、氫、氧元素外,尚有氮、磷、鉀、鎂、鈣、硫。它們
是植物細胞中構成核酸、蛋白質、酵素、葉綠體以及生物膜所必
不可缺少的元素。在培養基中常以kNO3,或Ca(NO3)2,那樣的硝
態氮來滿足培養物對氮素的需要,也有以硝態氮為主,補加
(NH4)2SO4。(氨態氮),滿足喜酸性植物的需要。
例如,適用於蘭花莖尖與種子萌發的培養基Vacin和Went(
1949)和KnudsonC(1946)培養基中就有(NH4)2SO4,。而MS培養基
主要以NH4NO3的形式,在培養基中既引入硝態氮,又引入氨態氮。
培養基中一定濃度的氮素不僅對於生長是必需的,也是胚胎發
生所必需的因素。
此外,氨基酸也曾作單一氮源加到培養基中,但效果不及
NO3-或NH4+經過一系列的反應,轉化成氨基酸,進而合成蛋白
,成為植物細胞主要組成成分之一。
磷是植物必需元素之一,參與植物生命過程中的核酸合成、
蛋白質合成、光合作用、呼吸作用以及能量的儲存、轉化與釋
放等重要生理生化過程。因此,在組織培養中,培養物需要大量
的磷。鉀、鈣、硫、鎂等影響看培養物中的酵素活性的方向,
決定著新陳代謝過程。近年來培養基中的K的用量有提高的趨勢。
3.[微量元素]
係指植物對這些元素需量極微,而且多了有毒,但缺乏了又
會產生代謝障礙。
培養基中僅需添加低於10-5~10-7M (克分子濃度)即能
滿足需要,稍多即發生毒害(植物細胞酵素失活、代謝障礙、蛋
白質變性、導致組織死亡)。鐵是植物細胞色素C電子傳遞系統中
必不可缺小的成分,也是某些酵素的活性中心。因此缺鐵引起的
代謝障礙是很易理解的了。以往,培養基中加入FeSO4。,常因
pH升高,而形成Fe(OH)3,沉澱物,致使雖然培養基中有鐵,然後
因呈不可吸收態而引起缺鐵。近年來,Fe已與螯合劑(EDTA-Na2:
結合的形式加入,克服了這一現象,使得pH即使為7時,也不缺鐵。
其他微量元素(銅、鋁、鋅、蜢、鈷等)對植物生命活動都
有重要作用。銅有促進離體根生長作用。
缺銅會減少細胞色素a的水平,使粒線體對KCN敏感。鉬是合成
活躍的硝酸還原酵素所必不可缺少的元素,是固氮酵素的組成部
分,它還有防止葉綠素受破壞的作用。錳與植物呼吸作用、光合
作用有關。,硼與糖的運輸、蛋白質的合成有關。總之,微量元
素在生命活動過程中,以酵素系中的輔基形式起著重要的作用。
4.[蔗 糖]
糖類是植物培養物不可缺少的碳源和能源。其中蔗糖是最好
的碳源和能源,其次是葡萄糖和果糖,在培養基中加入一定濃度
的蔗糖,既可作碳源,又可維持一定的滲透壓(一般在1.5-4.0大
氣壓範圍內)。
因植物種類,培養物的不同,最適蔗糖濃為1.5-2.0%。癒傷組
織與不定芽分化用量為3%,花藥培養為3-12%等。
5.[維生素]
植物培養物自身具有合成維生素的能力,但還不能滿足快速生
長的需要。培養基中添加維生素能保證培養物健康快速生以長。
維生素在植物培養物的生長中起看重要作用。因為它們
co-facter的形式參與生物催化劑一系列的活動。
參與細胞的蛋白質、脂肪、糖代謝等重要生命活動。添加到
培養基中的維生素濃度約在0.1一10mg之間。培養基中添加的維
生素有毗喀醒、胭酸、硫胺素、生物素及泛酸鈣等,均屬B族維
生素。
肌醇沒有促進生長的作用,但有助於活性物質發揮作用的效果。
並參與糖代謝。所以它能促進培養基中加入lmg/l的肌醇,就
足以影響維生素B,(即硫胺素)的效應。植物組織能忍受較高含量
的肌醇,在含有1g/1的肌醇的培養基上,組織仍不失去活力。
通常肌醇的用量為50一100mg/l。
6.[氨基酸]
甘氨酸能促進離體根生長,對植物組織的生長有良好的作用。
丙氨酸能促進胚狀體形成。絲氨酸、谷氨鮮鞍有利於花藥的胚
狀體或不定芽分化。酪氯酸可不同程度地替代水解酪蛋白、或
水解乳蛋白的(LH)良好作用。CH、LH是多種氨基酸的混合物,
對於培養物的不定胚、不定芽的分化起著良好的促進作用。因
此,近年來培養基中常添加甘氨酸2~3mg/l。LH或CH:300-
20OOmg/l。
7.[其他天然生長促進物質]
在離體胚珠和胚培養中因採用天然生長促進物質,取得培養
成功。最常用的是椰子汁(CW),用量為100-150ml/L。在買不到
椰子的地區和國家的研究者,可用酵母提取液(YE)、柑桔汁、
蘋果提取液、番茄汁、麥芽提取液、黃瓜汁等替代椰子汁,也
能取得較好效果,但不能完全替代。
8.[植物激素]
植物激素對於培養中的培植體的形態建成(即不定芽、不定
胚、不定根、花芽等的分化),起著重要而明顯的作用。
其中影響最顯著的是生長素和細胞激動素(又稱細胞分裂素,
包括激動素、6-卡基腺票呤,玉米素、Zip等),通常認為
生長素細細胞激動素出值大時,有利於跟的形成;比值小時,則
促進芽的形成。
低濃度2,4-D有利於胚狀體分化,但妨礙胚狀體進一步發育。
NAA有於單子葉植物的分化,紖朵丁酸(IBA)誘導生根效果最佳。
因此,應根據不同植物的種、品種,不同的培植體,以及不同
的培養目標,採用不同種類的植物激素和不同配比,以便達到
預期的目的。
生長素最當用的有2,4-D、NAA、IBA、IAA。作用強弱的
的次序為2,4-D>NAA>lBA>IAA。
細胞激動素常用的有KT、BA、(z)玉米素、2ip,它們的作
用強弱依次序為玉米素>2ip>BA>KT。
細胞激動素具有促進細胞的分裂和分化,延遲組織的衰老,
並增強蛋白質的合成,抗頂端優勢促進側芽生長,細胞激動素還
能顯著地改變其他激素的作用。
GA(吉貝素)通常不利於芽的分化,但能促進已分化的芽的伸長
生長。ABA(離素)、CEDP(乙烯利),在試管繁殖中較少使用。
9.[瓊脂]
是從海藻中提取出來的一種凝腹性物質,植物細胞不能利用
它,並由於它具有無毒害,可塑性,遇熱液化,冷卻後固形化,
可使各種可溶性物質均勻地擴散分布等的特性。
至今仍是一較理想的固體支撐物。其他支撐物,例如玻璃纖
維、耐高溫泡沫塑料、濾紙橋或濾紙杯等均不能完全替代它。
一般用量為0.6一1.0% ,商品瓊脂以白色、潔淨、用量少
即能固化為佳。培養基pH偏酸,則用量酌量增加。加熱時間過長,
溫度過高均會影響固化。質量差的瓊脂(色黃、多雜質)在使用
前最好用蒸餾水洗滌,以減少其中無機鹽和可溶性有機物的含量。
為了得到更潔淨的瓊脂,可將乾瓊指450g放在容量6l的大瓶中,
加蒸餾水5l,20小時後濾去液體,用蒸餾水洗三次,再用95%
的酒精浸一夜,將瓊脂取出,鋪在清潔的紗布上曬乾。
作者:
壞壞農場
時間:
2012-2-19 18:03
這個是作組培用的培養基簡介吧 一般的土耕或水耕作物 不能用MS培養基下去當肥料用 會出事情
作組織培養要很有耐心 也要很細心 由其是配這些培養基 就會搞到想尿尿
不過現在都已經有專業的公司代為調配 買配好的 依照比例稀釋 分裝 高溫高壓滅菌後 一般的效果都不錯
比較麻煩的是作繼代培養的時候 有很多生長激素都不耐高溫 有的是品質不佳 常常會因為這樣而失敗 還真的是很嘔的感覺
組培在種苗繁殖上被視為高效率無性繁殖的技術 但是還是有很多作物無法利用組培繁殖
而且整個包含栽培管理技術都要配套 方能達到植物工廠生產的要求
台灣的組培技術很強 很先進 但是後續配套的生產管理技術因為成本太高 蔬果價格太低 也沒有機會再外太空生產 在台灣沒有研發的必要與生存的空間 是一件很可惜的事情
美國的大城市已經有農企業投資大樓蓋植物工廠來供應當地的需求 很多技術都是台灣首創但是做到一半放棄的 很可惜
嘴砲王發發牢騷而已 哈
作者:
indu
時間:
2012-2-20 11:34
我屋後的荔枝樹仍屬於原地主的,最近特意找我看那棵樹,最後的重點如我所想,他想噴葯。我馬上想到唐朝的楊貴妃愛吃,可見古代在無農葯無化肥的情況下,農業仍是極興盛的。
在農葯和化肥及重機械的肆虐下,土地失去了生命力,因此現代人在唯物主義觀點下研究出的報告,僅適合失去生命力的土地。如果有人花大把大把鈔票,花大批大批的人力,投入研究如何創造最有生命力、無需農葯無需肥料也能豐產的知識,應該很多人會以為那是騙人的,或以為置身於魔法世界了。
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